前言
齐墩果酸是五环三萜类化合物，以游离体和配糖体的形式存在于多种植物中。齐墩果酸是白色针晶（乙醇）；无臭，无味，可溶于甲醇、乙醇、苯、乙醚、丙酮和氯仿，几乎不溶于水，对酸碱均不稳定。齐墩果酸主要具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤等作用，还具有降血糖、降血脂、镇静的作用，是开发治疗肝病和降血糖等药物有效成分。熊果酸是存在于天然植物中的一种三萜类化合物，具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应，因而被广泛地用作医药和化妆品原料。
表1. 齐墩果酸、熊果酸样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | CAS编号 |
齐墩果酸 | Oleanolic acid |  | C30H48O3 | 456.71 | 508-02-1 |
熊果酸 | Ursolic acid |  | C30H48O3 | 456.71 | 77-52-1 |
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
纯水(屈臣氏)；甲醇为色谱纯；冰醋酸分析纯；
马鞭草提取液：客户提供；
高效液相色谱柱：
Venusil XBP C18（A）；5 μm，120 ?；4.6×250 mm，
Venusil XBP C18（L）；5 μm，150 ?；4.6×250 mm；
色谱条件
色谱柱：
Venusil XBP C18（A）；5 μm，120 ?；4.6×250 mm；
Venusil XBP C18（L）；5 μm，150 ?；4.6×250 mm；
流动相：甲醇：0.2%冰醋酸（82.5：17.5，v/v）；
波长：210 nm；
流速：1.0 mL/min；
柱温：30℃；
进样量：20 uL。
结果与讨论
本实验采用Venusil XBP C18（A）和Venusil XBP C18 (L) 色谱柱对马鞭草提取液中齐墩果酸、熊果酸两种物质进行了测定。由表2和图1可知，流动相甲醇：0.2%冰醋酸（82.5：17.5，v/v/v），等度洗脱，两款色谱柱能够使齐墩果酸和熊果酸达到良好的分离。
表2. 马鞭草中齐墩果酸、熊果酸测试结果
色谱柱 | 化合物 | 保留时间min | 理论塔板数 | 分离度 |
Venusil XBP C18 (A) | 齐墩果酸 | 37.436 | 17967 | ~ |
熊果酸 | 39.474 | 18361 | 1.786 | |
Venusil XBP C18 (L) | 齐墩果酸 | 30.401 | 14756 | ~ |
熊果酸 | 32.047 | 14956 | 1.607 |
图1.Venusil XBP C18 (A) 马鞭草提取液供试品高效液相色谱图 (下图为放大)
图2.Venusil XBP C18 (L) 马鞭草提取液供试品高效液相色谱图 (下图为放大)
结论
本实验使用Venusil XBP C18（A）色谱柱 (5 μm；120 ?；4.6×250 mm) 和Venusil XBP C18（L）色谱柱(5 μm；150 ?；4.6×250 mm) 按照中国药典2015版马鞭草含量测定色谱条件，对马鞭草中齐墩果酸、熊果酸进行了测定，色谱柱分离效果良好，理论塔板数以熊果酸计算分别为18361和14956，都大于5000，能够满足检测要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
Venusil? XBP C18 (A) | 5 μm,120 ?, 4.6×250 mm | 1支 | VX952505-A |
Venusil? XBP C18 (L) | 5 μm,120 ?, 4.6×250 mm | 1支 | VX952505-L |
1.5 mL样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32×11.6 mm | 100/PK | 1109-0519 |
1.5mL样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE隔垫45°Shore A; 1.0 mm | 100/PK | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 单膜，13 mm，0.45 μm | 100个/包 | AS021345-T |
一次性注射器 | 2 mL无针头 | 100支/包 | LZSQ-2ML |
应用编号：AP10282